SpermDif-Quik Stain

(HIZLI SPERM BOYAMA KİTİ (GBL))

                  SpermDif-Quik ä insan spermlerinin KRUGER morfoloji tayini için kullanılan Hızlı bir Sperm Boya setidir.

 (Kruger -Tygerberg Strict Criteria )degerlendirme Boyası.Insan spermini boyayarak Tygerberg Strict kiriterlerine göre Kruger ve arkadaslarinin tanimlamasina uygun sperm morfolojisi degerlendirilmesinde kullanilan hızlı bir  boyadir. Havada Kurutulmuş İnsan Spermi Smir Slaydını 30 saniye gibi kısa bir sürede Boyar. Bir fiksatif ve iki adet boyadan olusur...  SpermDif-Quik ä Stain II Fosfat tamponlu thiazine içerir.

YÖNTEM:

1.Likefaksiye olmuş semenden bir damla alınıp bir lam üzerine ince bir film tabakası Smir şeklinde dilüe edilmeden yayılıp azami 5-15 dakika süre ile havada kurutulur.

2.Preperat en az 5 en çok 10 kez dik bir şale içerisinde bulunan SpermDif-Quik ä Fiksatif içine daldırılıp çıkarılır. Lamın kenarı şaleye değdirilerek  SpermDif-Quik ä Fiksatif  fazlası akıtılır. Fazlası ise bir kurutma kağıdı vasıtası ile emdirilir.

3. Preperat en az 5 en çok 10 kez dik bir şale içerisinde bulunan SpermDif-Quik ä StainI içine daldırılıp çıkarılır. Lamın kenarı şaleye değdirilerek  SpermDif-Quik ä StainI  fazlası akıtılır. Fazlası ise bir kurutma kağıdı vasıtası ile emdirilir.

4. Preperat en az 5 en çok 10 kez dik bir şale içerisinde bulunan SpermDif-Quik ä StainII içine daldırılıp çıkarılır. Lamın kenarı şaleye değdirilerek  SpermDif-Quik ä StainII  fazlası akıtılır. Fazlası ise bir kurutma kağıdı vasıtası ile emdirilir.

5. Preperat en az 5 en çok 10 kez dik bir şale içerisinde bulunan Çeşme Suyu içine daldırılıp çıkarılır. Lamın kenarı şaleye değdirilerek  Suyun  fazlası akıtılır. Fazlası ise bir kurutma kağıdı vasıtası ile emdirilir.

6. Preperat havada kurumaya bırakılır. Boyama işlemi Bitmiş olup Preperat iyice kuruduğunda İnceleninceye kadar bekletilebilir.

7. İmmersiyon yagı kullanılarak 100x bütmeli ışık mikroskobu kullanılarak boyanan preperat incelenir.

Akrozomal Bölge AÇIK MOR  renginde boyanır

PostAkrozomal bölge,Boyun ve Kuyruk KOYU MOR  renginde boyanır

8. Tüm alanda en az 200 adet sperm bakılıp Sayılmalı ve Oran 100 de olarak verilmelidir.

İnceleme WHO yada Strict Kriterler göz önüne alınarak yapılır.

REf: Atlas of Human Sperm Morphology /R.Menkveld,E.E. Oettle,T.F.Kruger ….(Williams&Wilkins)

Kit Muhteviyatı: 3x(250ML/500ML)

SpermDif-Quik ä Fiksatif  Metanol bazlı Fast Green Boya (GBL)

SpermDif-Quik ä Stain I Kstanten İçerikli bir fosfat tampon ve Sodyum azid koruyucusu (GBL)

SpermDif-Quik ä Stain II Fosfat tamponlu thiazine . (GBL)